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Ácido 8-anilino-1-naftalenossulfônico(ANS), fórmula molecular C6H5NHC10H6SO3H, com cristais verdes acinzentados em forma de agulha ou folha. Seu sal de sódio é um cristal em forma de agulha ou em flocos, verde claro a cinza. Insolúvel em água, solúvel em etanol. Seu hidrato de sal de amônio tem um ponto de fusão de 242-244 graus. É um corante intermediário usado para produzir BR preto fracamente ácido, azul profundo fracamente ácido 5R, bem como corantes sulfuretos e azo. Agentes de detecção de fluorescência para pesquisa de proteínas. 1,8-ANS é um corante fluorescente com alta afinidade pela superfície hidrofóbica das proteínas. Depois de experimentar um desvio para o azul e um aumento significativo na intensidade de fluorescência, o 1,8-ANS liga-se à superfície da proteína da região de baixa polaridade 1,2. Estas propriedades tornam o 1,8-ANS muito adequado para medir a afinidade de ligantes hidrofóbicos e suas proteínas de ligação correspondentes, como proteínas de ligação a ácidos graxos (FABPs) com ácidos graxos livres hidrofóbicos 1,2,3. Quando combinado com 1,8-ANS, o valor de Kd é ~9,7 µM (24,5 graus C) 2. Agentes de detecção de fluorescência para pesquisa de proteínas. Intermediário de corantes azo. Usado para a fabricação de corantes ácidos, como azul marinho R, preto ácido fraco BR, azul profundo ácido fraco 5R, GR e verde brilhante sulfurizado 7B.
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Fórmula Química |
C16H13NO3S |
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Massa Exata |
299 |
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Peso molecular |
299 |
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m/z |
299 (100.0%), 300 (17.3%), 301 (4.5%), 301 (1.4%) |
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Análise Elementar |
C, 64.20; H, 4.38; N, 4.68; O, 16.03; S, 10.71 |
O ácido 8-anilino-1-naftenossulfônico (ANS), como um importante corante fluorescente, tem demonstrado amplo valor de aplicação na pesquisa de proteínas. Suas propriedades únicas de fluorescência e alta afinidade por superfícies hidrofóbicas de proteínas tornam-no uma ferramenta poderosa para estudar a estrutura, função e interações de proteínas.
1. Como sonda fluorescente para detecção de proteínas
(1) Detecção direta de proteínas
Pode ser usado diretamente para detecção de fluorescência de proteínas. Quando misturado com proteínas, devido à sua alta afinidade pela superfície hidrofóbica das proteínas, liga-se às regiões não-polares das proteínas, resultando em um aumento significativo na intensidade da fluorescência. Ao observar mudanças nos sinais de fluorescência, a detecção de proteínas e a análise quantitativa podem ser alcançadas. Este método tem as vantagens de alta sensibilidade, operação simples e boa reprodutibilidade, e tem amplas perspectivas de aplicação em áreas como bioquímica e biologia molecular.
(2) Monitoramento de mudanças conformacionais de proteínas
As mudanças conformacionais das proteínas são a base para a sua implementação funcional. Pode monitorar mudanças na conformação de proteínas em tempo-real. Quando uma proteína sofre alterações conformacionais, as regiões hidrofóbicas na sua superfície também sofrem alterações, afetando assim o sinal de ligação e fluorescência da substância. Portanto, observando as mudanças nos sinais de fluorescência, as mudanças conformacionais das proteínas podem ser inferidas. Isto é de grande importância para a compreensão dos mecanismos funcionais das proteínas.
2. Estudando a interação entre proteínas e ligantes
(1) Determinação da afinidade
Pode ser usado para determinar a afinidade entre proteínas e ligantes hidrofóbicos. Ao medir as alterações na intensidade de fluorescência da substância após a ligação às proteínas, a força de ligação e o modo de ligação entre ligantes e proteínas podem ser avaliados. Este método é particularmente adequado para estudar a interação entre ácidos graxos livres hidrofóbicos e proteínas de ligação a ácidos graxos (FABPs) e outros sistemas.
(2) Explorando interações de ligação a proteínas
Também pode servir como molécula repórter ou ligante competitivo, fornecendo novas direções para explorar as interações de ligação entre proteínas e outras moléculas. Ao misturá-lo com proteínas e observar mudanças nos sinais de fluorescência, o mecanismo de interação entre proteínas e outras moléculas pode ser revelado, fornecendo informações importantes para o desenvolvimento de medicamentos, tratamento de doenças e outros campos.
3. Outros aspectos aplicados à pesquisa de proteínas
(1) Rotulagem de proteínas
Pode ser usado para marcar proteínas, especialmente aquelas com superfícies hidrofóbicas. Ao ligá-lo a proteínas e observar sinais de fluorescência, a posição e distribuição das proteínas podem ser rastreadas em experimentos, proporcionando conveniência para localização de proteínas e pesquisa funcional.
(2) Estudando o enovelamento de proteínas
O dobramento de proteínas é uma etapa crucial na aquisição da função proteica. Pode ser usado para monitorar o processo de dobramento de proteínas. Durante o enovelamento da proteína, as regiões hidrofóbicas da sua superfície sofrem alterações, que afetam o sinal de ligação e fluorescência do produto. Ao observar as mudanças nos sinais de fluorescência, o processo dinâmico e o mecanismo de dobramento das proteínas podem ser compreendidos.
(3) Aplicação de glóbulos brancos fixos em cinco reagentes de células sanguíneas de classificação
No campo dos exames médicos, também pode ser utilizado para a fixação de glóbulos brancos em cinco reagentes de células sanguíneas de classificação. Através das suas características de fluorescência, pode ser conseguida uma marcação e fixação eficazes de glóbulos brancos, fornecendo suporte de dados precisos para análise e diagnóstico celular subsequentes.
Processo de tingimento em corantes ácidos
Como um importante intermediário dos corantes ácidos, o processo de tingimento do ácido 8-fenileno-1-naftalenossulfônico tem um impacto significativo no efeito de tingimento e no desempenho de solidez dos corantes.
Antes de tingir é necessário pré-tratar as fibras. Isto inclui a remoção de impurezas e manchas de óleo da superfície das fibras, bem como o ajuste do pH e das condições de temperatura das fibras. Essas etapas de pré-processamento podem garantir que o corante penetre uniformemente nas fibras e melhore o efeito e a solidez do tingimento.
A seleção das condições de tingimento tem um impacto significativo no efeito de tingimento e no desempenho de solidez dos corantes. Isso inclui fatores como concentração de corante, temperatura de tingimento, tempo de tingimento e valor de pH. Ao selecionar as condições de tingimento, é necessário considerar de forma abrangente fatores como o tipo de fibra, as propriedades do corante e os requisitos de tingimento. Por exemplo, para fibras proteicas como lã, podem ser escolhidas temperaturas de tingimento mais baixas e tempos de tingimento mais longos; Para fibras sintéticas como o náilon, é necessário escolher temperaturas de tingimento mais altas e tempos de tingimento mais curtos.
Após a conclusão do tingimento, é necessário o pós{0}}tratamento das fibras. Isso inclui etapas como lavar, fixar e amaciar. A lavagem pode remover corantes e aditivos que não estão fixados na superfície das fibras; A cor fixa pode melhorar o desempenho de solidez dos corantes; A suavidade pode melhorar a sensação e o conforto das fibras. Essas etapas de pós{4}}processamento podem melhorar ainda mais o efeito e a qualidade do tingimento.
O método de síntese deÁcido 8-anilino-1-naftalenossulfônicoinclui duas etapas de reação: a primeira etapa é preparar o ácido 8-naftalenossulfônico; o segundo passo é adicionar anilina para preparar o produto. O processo operacional específico da reação em duas etapas será apresentado em detalhes abaixo.
Etapa 1: Preparação de ácido 8-naftalenossulfônico:
Passos:
1. Adicionar 83,108g de Naftaleno e 77,335g de CrO3 no frasco de nitração;
2. Adicione 244mL de ácido nítrico 3,4mol/L, não adicione tudo de uma vez;
3. Despeje uma pequena quantidade de água e use um alambique para destilar a substância fervente marrom-avermelhada;
4. Mantenha a temperatura da água acima de 80 graus durante o processo de destilação;
5. Quando a destilação atingir o ponto de ebulição, desligue o aquecedor, dilua lentamente o ácido nítrico no líquido neutralizante de alta-temperatura que é 3 vezes a quantidade da mistura reagente e mexa ao mesmo tempo;
6. Após resfriamento, lavar o produto bruto com 1 L de água;
7. Filtrar o produto bruto e recolher os cristais finos da castanha;
8. Lave os cristais com água deionizada;
9. Colete o ácido 8-naftalenossulfônico seco sob vácuo.
Passo 2: Preparação deÁcido 8-anilino-1-naftalenossulfônico:
Passos:
1. Coloque ácido 8-naftalenossulfônico no frasco cônico;
2. Adicione 3,2mL de anilina, 1mL de ácido clorídrico e 5mL de água deionizada e aqueça até a temperatura ambiente;
3. Em seguida, adicione 5mL de metanol e 5mL de acetona e, em seguida, transfira a mistura para o tubo do copo de lavagem;
4. Use goma de mascar para preencher a abertura do tubo de lavagem de copos para evitar que outras substâncias além da mistura entrem nele;
5. Posteriormente, reagir sob condições padrão, manter a temperatura à temperatura ambiente e agitar;
6. Ao final da reação, o produto foi filtrado sob vácuo e lavado com pequena quantidade de metanol;
7. Seque o produto em vácuo.
Acima estão as etapas operacionais específicas, precauções e materiais operacionais do método de síntese do produto. Uma certa base química e experiência experimental são necessárias para garantir a segurança e o sucesso do processo operacional.
Propriedades ópticas:
O ANS possui propriedade fluorescente, ou seja, emitirá um sinal fluorescente após ser excitado pela luz ultravioleta. O comprimento de onda máximo de excitação do ANS é 350nm, e o comprimento de onda máximo de emissão de fluorescência é 456nm, que pode ser usado para medir a conformação espacial e a força iônica de biomacromoléculas por fluorescência. Além disso, a intensidade de fluorescência do ANS foi afetada pelo valor do pH, e a intensidade da fluorescência foi maior quando o valor do pH era 4,5.
Em resumo, o ANS é uma molécula hidrofílica com alto ponto de fusão e ebulição, solúvel em água e solventes orgânicos, possui propriedades fluorescentes e pode ser utilizada em análises e pesquisas biológicas.
Tudo o que você precisa saber
O que é ácido 8 anilino 1 naftaleno sulfônico?
O ácido 8-anilinonaftaleno-1-sulfônico é um ácido naftalenossulfônico que éácido naftaleno-1-sulfônico substituído por um grupo fenilamino na posição 8. Tem a função de sonda fluorescente. É um aminonaftaleno e um ácido naftalenossulfônico.
Para que é utilizado o ácido naftalenossulfônico?
O condensado de formaldeído de ácido naftaleno sulfônico é um tipo de dispersante com boas propriedades, como umectante, emulsificante e dispersante. É amplamente utilizado comodispersante de revestimento, dispersante de corante, redutor de água de cimentoe assim por diante.
Quais são os perigos do sal de amônio do ácido 8 anilino 1 naftalenossulfônico?
Declaração(ões) de perigoH315 Provoca irritação cutânea. H319 Provoca irritação ocular grave. H335 Pode provocar irritação respiratória. Declaração(ões) de precaução P261 Evite respirar poeiras/fumos/gases/névoas/vapores/aerossóis.
Qual é a utilidade do reagente ANSA?
Como uma sonda fluorescente, o ANS pode ligar-se especificamente à região hidrofóbica de proteínas (como proteínas de membrana) e monitorar a dinâmica da conformação da proteína através de alterações nos sinais fluorescentes. É amplamente utilizado empesquisa bioquímica e desenvolvimento de material antibacteriano.
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