Pó Iptg CAS 367-93-1

Pó Iptgpode ser usado como local de ação anestésica local, é aplicado como agente espalhador para alívio da dor pós-operatória de feridas e dor de úlcera. Reagentes biológicos moleculares comumente usados ​​na triagem de manchas azuis e brancas e na expressão de proteínas induzidas por IPTG em bactérias. IPTG, nome completo isopropil- - D-tiogalactosídeo, CAS 367-93-1, fórmula molecular C9H18O5S, peso molecular 384,37 Daltons, pertence a compostos de moléculas pequenas. Pó branco ou quase branco, com baixa solubilidade em água, mas melhor solubilidade em solventes orgânicos. Existem grupos iônicos nas moléculas, portanto elas apresentam um certo grau de condutividade na água. Estável à temperatura ambiente, mas fácil de decompor sob alta temperatura ou fortes condições ácidas e alcalinas. Não há odor óbvio, mas um leve odor de composto orgânico pode ser emitido durante o uso. É um indutor comumente usado para induzir a expressão de proteínas em bactérias. No diagnóstico médico, o IPTG pode servir como sonda fluorescente ou agente cromogênico para detectar moléculas ou tecidos específicos em amostras. Ao combinar-se com moléculas alvo, o IPTG pode gerar sinais fluorescentes ou alterações de cor, fornecendo um forte suporte para o diagnóstico de doenças.

Pó Iptg,Parâmetros físicos, Mp. : 114 ~ 121 graus C, Descrição do uso, Reagentes comuns de biologia molecular, comumente usados ​​em triagem azul-branca e expressão de proteína induzida por IPTG-em bactérias. , Especificações de embalagem, 1G, 5G, 25G, 100G, 1KG, Condições de armazenamento

Refrigerado de 2 a 8 graus, protegido da luz, Descrição do perigo, Código de perigo: Xi, Nível de risco: R36/37/38, Nível de segurança: S23-24/25-36.

O IPTG é comumente usado em experimentos de clonagem que precisam induzir a atividade da -galactosidase. É frequentemente usado em combinação com X-Gal ou Bluo-Gal para triagem azul-branca de colônias bacterianas recombinantes, que podem ser induzidas pelo Chemicalbook a expressar o operon lac em E. coli. O IPTG se liga à proteína repressora lacI e altera sua conformação para evitar a inibição do gene lacZ codificado pela -galactosidase.

IPTG, nome completo isopropil- -D-tiogalactosídeo, é um indutor comumente usado para induzir e regular a expressão de proteínas. Devido à sua estrutura e função únicas, o IPTG é geralmente preparado usandoPó Iptgmétodos de síntese em laboratório.

Pó Iptgnome completo isopropil- - D-tiogalactosídeo é um indutor comumente usado para induzir e regular a expressão de proteínas.

1. Indução da expressão proteica:

O IPTG desempenha um papel importante na indução da expressão proteica. É um indutor amplamente utilizado que pode induzir eficientemente a expressão de genes específicos em bactérias, obtendo assim a proteína alvo desejada em um curto período de tempo. Seu mecanismo de ação é ligar-se ao gene lacI da bactéria, inibir a atividade de sua proteína reguladora da transcrição, abrindo assim o operon lac da bactéria e iniciando a expressão dos genes alvo. Ao usar operons de lactose como promotores para expressão proteica, são necessários indutores, e o IPTG pode atuar como um análogo da lactose para induzir a expressão de galactosidase em Escherichia coli. Não pode ser utilizado pelas células para alcançar expressão sustentada. IPTG se liga ao lac|produtos, causando mudanças conformacionais longe do lacO, ativando assim a transcrição. Esta regulação transcricional indutível tornou-se um elemento comumente utilizado na construção de vetores do sistema de expressão de E. coli.

2. Regulação da expressão genética:

 

O IPTG desempenha um papel importante na regulação da expressão gênica. Como um importante reagente experimental, desempenha um papel importante na regulação da expressão gênica e nos experimentos de superexpressão de proteínas. Ao controlar o tempo de adição e a concentração de IPTG, pode ser alcançada a regulação da expressão da proteína alvo. Este efeito regulatório baseia-se na ligação do IPTG ao lac|produtos em operons de lactose, alterando sua conformação, deixando assim lacO e ativando ainda mais a transcrição. Este mecanismo de regulação transcricional indutível torna o IPTG de grande importância em campos de pesquisa como função genética, interações proteicas e triagem de medicamentos.

3. Cristalização de proteínas:

 

Em experimentos de cristalização de proteínas, o IPTG é usado como indutor para promover a cristalização de proteínas. Seu mecanismo de ação é alterar a conformação das proteínas, ligando-se às regiões hidrofóbicas das proteínas, promovendo assim a agregação e a cristalização entre as moléculas proteicas. Este processo de agregação e cristalização é reversível, portanto a cristalização da proteína pode ser induzida pela adição de IPTG, ou os cristais de proteína podem ser dissolvidos pela remoção do IPTG.

Em experimentos de cristalização de proteínas, o IPTG é geralmente adicionado à solução proteica como a concentração final de 1mM. Esta baixa concentração de IPTG pode evitar a indução excessiva de proteínas, conseguindo assim melhores efeitos de cristalização. Ao mesmo tempo, o IPTG também pode servir como acompanhante molecular para auxiliar no correto dobramento e agregação de proteínas, obtendo assim cristais proteicos mais uniformes.
Deve-se notar que o IPTG não promove a cristalização de proteínas em todos os casos. Algumas proteínas não são sensíveis ao IPTG, ou devido à sua estrutura e propriedades inerentes que não são adequadas para cristalização, são necessárias validação experimental e otimização para diferentes proteínas para determinar as condições e métodos ideais de cristalização.

Citotoxicidade

 

Toxicidade para células procarióticas

Embora o IPTG seja comumente usado para induzir a expressão gênica em células procarióticas, altas concentrações de IPTG podem ter efeitos tóxicos nas células procarióticas. A pesquisa mostrou que quando a concentração de IPTG é muito alta, pode interferir nos processos metabólicos normais dentro das células. Por exemplo, pode afetar o metabolismo energético das células, interferir em vias como a glicólise e o ciclo do ácido tricarboxílico, levando a uma diminuição na produção intracelular de ATP e afetando o crescimento e a proliferação celular. Além disso, altas concentrações de IPTG também podem danificar a integridade da membrana celular, aumentar a sua permeabilidade, levar ao vazamento de substâncias intracelulares e permitir que substâncias nocivas do ambiente extracelular entrem na célula, causando assim a morte celular. Experimentos descobriram que quando Escherichia coli é cultivada em um meio contendo altas concentrações de IPTG, a taxa de crescimento das bactérias diminui significativamente e o número de bactérias viáveis ​​diminui gradualmente com o prolongamento do tempo de cultivo. Isto indica que altas concentrações de IPTG têm um certo efeito inibitório e letal sobre Escherichia coli.

Toxicidade para células eucarióticas

Além das células procarióticas, o IPTG também pode ser tóxico para as células eucarióticas. Existem certas diferenças na estrutura e função entre células eucarióticas e células procarióticas, mas o IPTG ainda pode afetar as funções fisiológicas normais das células eucarióticas através de várias vias. Por um lado, o IPTG pode interferir nas vias de transdução de sinal nas células eucarióticas. A transdução de sinal dentro das células desempenha um papel regulador crucial em processos como crescimento, diferenciação e apoptose. O IPTG pode alterar a intensidade e a direção da transdução de sinal, interagindo com certas moléculas sinalizadoras dentro das células, afetando assim as atividades fisiológicas normais das células.

Toxicidade para células eucarióticas

Por outro lado, o IPTG pode induzir resposta ao estresse oxidativo em células eucarióticas. O estresse oxidativo refere-se a um desequilíbrio entre a oxidação intracelular e a atividade antioxidante, levando a um aumento na produção de espécies reativas de oxigênio (ROS). O excesso de ERO pode atacar biomoléculas como DNA, proteínas e lipídios dentro da célula, causando danos celulares e comprometimento funcional. A pesquisa descobriu que, sob certas condições, o tratamento de células eucarióticas com IPTG aumenta significativamente os níveis intracelulares de ERO, acompanhado por uma diminuição na viabilidade celular e um aumento na taxa de apoptose. Isto sugere que o IPTG pode induzir resposta ao estresse oxidativo e exercer toxicidade nas células eucarióticas.

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