Bremelanotida(Ligação:https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/peptídeo/bremelanotide-powder-cas-189691-06-3.html) é um hormônio polipeptídico sintético cuja estrutura é semelhante à leptina, tirosina e melanina da pele que existem naturalmente no corpo humano. Por ser um novo tipo de medicamento, a Bremelanotida tem função reguladora e é frequentemente utilizada no tratamento de disfunção erétil e baixa libido. Os cenários de uso na vida diária estão se tornando cada vez mais extensos. Com a pesquisa aprofundada sobre ele, as pessoas descobriram muitos tipos de seus métodos de síntese, que serão analisados um por um a seguir.
1. Sintetizado a partir de L-tirosina:
No método de síntese original, a estrutura da Bremelanotida foi obtida pela deformação da L-tirosina. Primeiro, a L-tirosina é convertida em dipeptidil-L-tirosina (Boc-Tyr(OCO)2-OH) na presença de ácido fluorídrico, onde Boc representa o grupo succinimidometil (t-butoxicarbonil). Em seguida, adicione álcool benzílico (PhCH2OH), 1-(3-dietilaminopropoxi)-2-(2-metazolil)etano (EDC) e N-hidroxibutanodiol em reagentes de tetrahidrofurano (THF) tal como a imida (HOBt) pode combinar dipeptidil-L-tirosina com pseudopeptídeo alanina (Phe-Aib-Aib-Lys(Ac)-Gly-Lys(Ac)-Aib-Leu-NH2) foi sintetizada em Bremelanotida.
(1) Conversão de L-tirosina em dipeptidil-L-tirosina:
Primeiro, dissolva a L-tirosina em água e adicione a quantidade adequada de ácido fluorídrico. Normalmente, a concentração de L-tirosina é 1M e a quantidade de ácido fluorídrico é 5-10%. A mistura foi deixada repousar a 0-4 graus durante 1 hora e depois extinta.
Em seguida, o complexo L-tirosina-ácido fluorídrico obtido foi adicionado gota a gota ao tetra-hidrofurano. Ao mesmo tempo, uma quantidade apropriada de reagentes de reação, tais como álcool benzílico, EDC e HOBt, foi adicionada ao tetra-hidrofurano. Após repouso por 2 horas sob agitação, pode-se obter dipeptidil-L-tirosina (Boc-Tyr(OCO)2-OH).
(2) Reação de dipeptidil-L-tirosina com pseudopeptídeo alanina:
Dissolva a dipeptidil-L-tirosina obtida em N,N-dimetilformamida (DMF) e adicione o pseudopeptídeo alanina. As condições de reação incluem temperatura, tempo de reação e concentração de reagentes, etc. Esses fatores afetarão o rendimento e a pureza do produto. A uma concentração de 225 g/L, a proporção de Boc-Tyr(OCO)2-OH para pseudopeptídeo alanina foi de 1:30.
Após agitação e repouso em -N,N-dimetilformamida durante 24 horas, a solução reaccional foi vertida em água gelada e precipitada com solução de aldeído ácido. O resultado é o produto final da Bremelanotida.
O método de síntese apresenta principalmente as seguintes vantagens: alta pureza do produto e processo de produção simples. Mas este método também tem algumas desvantagens, como demorado, alto custo e assim por diante.
2. Síntese em fase sólida:
A síntese em fase sólida é atualmente um dos métodos sintéticos mais comumente usados para Bremelanotida e também é um método sintético importante no campo da síntese de peptídeos. Nos métodos de fase sólida, as cadeias polipeptídicas são construídas por adições sucessivas de unidades de aminoácidos. Primeiro, a primeira unidade de aminoácido é modificada em um grupo protetor de N estericamente restritivo e não degradável (tal como Fmoc), que é então ligado ao meio poroso. Em seguida, através da introdução do grupo protetor de ácido acrílico, reação de acilação e outras etapas, cada unidade de aminoácido é adicionada ao meio poroso e uma cadeia polipeptídica completa é gradualmente construída. Finalmente, nas etapas de remoção do grupo N-protetor, desnitrificação, etc., pode ser preparada uma cadeia polipeptídica de Bremelanotida com uma sequência específica.
O método de síntese em fase sólida apresenta principalmente as seguintes vantagens: alta eficiência e alta taxa de utilização de matérias-primas. Mas este método sintético também tem algumas desvantagens, como são necessárias múltiplas etapas de secagem e lavagem no processo de produção, e essas etapas levarão a um declínio na qualidade do produto.
3. Síntese em fase líquida:
A síntese em fase líquida é outro método de síntese da Bremelanotida, que é realizada através de um sistema de reação líquida. As principais etapas do método de síntese incluem triagem de matéria-prima, projeto de moléculas de medicamentos, seleção de rota de síntese, reação, purificação e similares. Comparado com a síntese em fase sólida, o método de síntese em fase líquida pode obter Bremelanotida com maior pureza e atividade biológica. No método de síntese em fase líquida, os reagentes de reação comumente usados são dihidroxietil mercaptano (EDT), agente etoxicarbonilante (EEDQ), cloreto de tioacetil, etc.
O método de síntese em fase líquida apresenta principalmente as seguintes vantagens: operação simples e alta pureza do produto. No entanto, este método de síntese também apresenta algumas desvantagens, como período de síntese mais longo e custo mais elevado.
4. Síntese físico-química:
No método de síntese físico-química, a Bremelanotida é sintetizada por métodos físicos e químicos. Este método tem principalmente duas abordagens diferentes: uma é realizar a síntese de Bremelanotida através de operações repetidas de transformação de fase sólido-líquida; a outra é promover a automontagem e polimerização de cadeias polipeptídicas por meio de compressão física e mecânica, sintetizando assim a Bremelanotida.
Mecanismo de reação:
A síntese do Bremelanotida ocorre principalmente pela conversão da L-tirosina em acilato L-fenólico, depois pela síntese do acilato L-fenólico e do pseudopeptídeo e, finalmente, pela obtenção do produto. O mecanismo da reação é o seguinte:
(1) Conversão de L-tirosina em acilato de L-fenol:
A L-tirosina reage com azida de sódio em solução de THF para gerar acilato de L-fenol. A azida de sódio converterá o grupo hidroxila da tirosina em um grupo azida e, em seguida, o tratamento ácido converterá o grupo azida em um acilato fenólico.
(2) O acilato de L-fenol é convertido em cloreto ácido:
O acilato L-fenólico reage com cloreto de acetila em THF para produzir cloreto ácido. Cinco vezes a quantidade de TBHS é para absorver o HCl gerado. Cloretos ácidos são intermediários de reação necessários para reações subsequentes.
(3) Síntese de cloreto ácido e pseudopeptídeo:
O cloreto ácido intermediário reage com o pseudopeptídeo no DMF para gerar a cadeia polipeptídica do Bremelanotida. O que acontece nesta etapa é uma reação de condensação do anidrido, na qual o HOBt é o catalisador.
(4) Purificação e análise do produto:
O produto final também precisa ser purificado e analisado para garantir a pureza e a qualidade do composto.
O método de síntese físico-química apresenta principalmente as seguintes vantagens: operação simples e curto período de preparação. No entanto, este método sintético também apresenta algumas desvantagens, tais como baixa pureza do produto e diversidade insuficiente de produtos.
Em conclusão, os métodos de síntese da Bremelanotida são diversos e flexíveis, e a seleção depende de muitos fatores, como condições de reação, custo de síntese e tempo de reação, etc. chaves para a síntese bem sucedida de Bremelanotida.