epitalon(Ligação:https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/peptide/epitalon-powder-CAS-307297-39-8.html) é uma molécula peptídica, considerada de boa atividade biológica e potencial valor medicinal. Atualmente, a pesquisa do peptídeo epitalon está focada principalmente em sua aplicação como agente antienvelhecimento.
O Epitalon pode prolongar o comprimento dos telômeros nas extremidades dos cromossomos ativando a telomerase, afetando positivamente a proliferação e a regeneração das células-tronco. Estudos demonstraram que o Epitalon pode inibir significativamente o estresse oxidativo prejudicial, reduzir os danos ao DNA e regular a expressão do fator de crescimento semelhante à insulina-1 (IGF-1) e, finalmente, alcançar o efeito de reduzir a velocidade de envelhecimento e prolongamento da vida.
Além disso, o Epitalon também possui efeitos imunomoduladores e neuroprotetores. Epitalon pode aumentar a imunidade humana e promover o reconhecimento do corpo e a depuração de heterogêneos e auto-antígenos. Além disso, o Epitalon também pode reduzir a morte celular neuronal e a neurodegeneração, alcançando assim efeitos neuroprotetores. Epitalon também tem efeitos anticancerígenos e exerce seus efeitos regulando o ciclo celular, promovendo a apoptose celular e inibindo a proliferação de células tumorais.
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Epitalon é um potenciador corporal, um composto polipeptídico composto por quatro aminoácidos alanina (Ala), ácido glutâmico (Glu), asparagina (Asp) e lisina (Lys). Os métodos de síntese do Epitalon são divididos principalmente em síntese química e biossíntese.
Método de síntese química:
Epitalon é um peptídeo composto por quatro aminoácidos com a fórmula molecular C14H22N4O9. Epitalon pode promover a liberação do hormônio do crescimento humano, ajudando assim a retardar o envelhecimento, melhorar o sono e aumentar a imunidade.
1. Preparação de reagentes:
Os reagentes para a síntese do Epitalon incluem quatro aminoácidos, alanina (Ala), ácido glutâmico (Glu), asparagina (Asp) e lisina (Lys), além de reagentes acilantes como Boc-Lys-OtBu e Asp( OtBu) 2 e assim por diante. A pureza desses aminoácidos e reagentes deve ser superior a 99 por cento, caso contrário, a qualidade do produto será afetada.
2. Etapas da Síntese Química
2.1 Síntese de alanina-4-anidrido hidroxibutírico (Ala-Hyp):
First, mix alanine (Ala) and 4-hydroxybutyric anhydride (Hyp-OtBu), and carry out acylation reaction with an activator such as DCC, EDC, etc. under anhydrous environment to generate alanine-4-hydroxybutyric anhydride (Ala-Hyp). The final product was white crystals with >95% de pureza.
2.2 Síntese de Ala-Hyp-Glu-OtBu:
The synthesized alanine-4-hydroxybutyric anhydride and glutamic acid-butyrate (Glu-OtBu) were mixed in proportion, and then underwent multiple condensation reactions in anhydrous environment to obtain Ala-Hyp-Glu-OtBu. The final product is a white powder with a purity >95 por cento
2.3 Síntese do Epitalon:
Adicione Asp(OtBu)2 e Boc-Lys-OtBu no sistema de reação de condensação na ordem projetada com antecedência e passe por várias reações de condensação para obter Epitalon. O processo é como se segue:
a. Reação do grupo de desproteção:
Primeiramente, o Asp(OtBu)2 foi desprotegido, e o grupo protetor do Asp(OtBu)2 foi removido usando hidróxido de sódio (NaOH) e ácido tricloroacético (TCA) para gerar unidades estruturais Asp e liberar BuOt ao mesmo tempo. O tempo de reação foi de 1 hora e a temperatura foi a temperatura ambiente. Após a reação, realizar a neutralização ácido-base, adicionar uma grande quantidade de solução saturada de cloreto de sódio, precipitar com etanol e secar no vácuo para obter Asp como um sólido branco.
b. Reação de condensação:
Adicionar Asp e Ala-Hyp-Glu-OtBu no sistema de reação de condensação e, em seguida, realizar várias reações de condensação para obter Epitalon. Esse processo precisa ser feito por meio de diferentes tratamentos.
O primeiro passo: remover o grupo protetor Ala-Hyp:
Primeiro, Ala-Hyp-Glu-OtBu foi dissolvido em metanol, ácido tricloroacético (TCA) e água foram adicionados para remover o grupo protetor Hyp-OtBu usado para proteger o grupo amino para gerar Ala-Hyp-Glu-OH. A reação deve ser realizada à temperatura ambiente e a solução da reação é tratada com NaOH após a reação para neutralizar a acidez.
A segunda etapa: remover o grupo protetor Glu-OtBu:
Em seguida, após secagem completa, Ala-Hyp-Glu-OH foi misturado com Boc-Lys-OtBu, ácido tricloroacético e água foram adicionados novamente e a reação foi realizada à temperatura ambiente. Esta reação remove o grupo protetor Glu-OtBu para gerar Ala-Hyp-Glu-Lys(Boc)-OtBu.
A terceira etapa: remover o grupo protetor de Lys:
Finalmente, a adição de ácido tricloroacético, água e metanol remove o grupo protetor Boc-Lys-OtBu para gerar Epitalon. A reação deve ser realizada à temperatura ambiente e a solução da reação é tratada com NaOH após a reação para neutralizar a acidez.
3. Análise de resultados:
Obtém-se finalmente o produto Epitalon, que pode ser caracterizado e purificado por diferentes métodos analíticos. Por exemplo, parâmetros como pureza, impurezas e peso podem ser determinados usando métodos de purificação como a Farmacopeia Europeia (EP) ou a Farmacopeia dos Estados Unidos (USP).
4. Resumo:
Epitalon é um reforço corporal composto pelos quatro aminoácidos alanina, ácido glutâmico, asparagina e lisina. O método de síntese química do Epitalon inclui principalmente o método de síntese em fase sólida e o método de síntese em fase líquida, que precisam unir vários aminoácidos por meio de reações em várias etapas. Este processo requer um controle cuidadoso das condições de reação e técnicas de purificação para garantir produtos de alta pureza.
Método biossintético:
O método de biossíntese é usar a biocatálise de microorganismos ou enzimas sintéticas para preparar o Epitalon, incluindo fermentação e catálise enzimática.
1. Método de fermentação: O método de fermentação é um método biossintético que utiliza o microrganismo transgênico Escherichia coli para expressar Epitalon. Primeiro, coloque a sequência do gene Epitalon em Escherichia coli e cultive-a em massa para expressão. Em seguida, várias técnicas de purificação, como cromatografia de troca iônica e cromatografia em gel, são usadas para finalmente obter produtos puros. As etapas específicas são as seguintes:
1.1 Selecione a bactéria hospedeira apropriada:
Para sintetizar o Epitalon, é necessário selecionar uma cepa hospedeira adequada para expressão. Bactérias hospedeiras comumente usadas incluem Escherichia coli (Escherichia coli), levedura (Saccharomyces cerevisiae) e fungos (Aspergillus oryzae). Ao selecionar bactérias hospedeiras, é necessário considerar se as bactérias hospedeiras têm a capacidade de sintetizar proteínas com eficiência, se podem dobrar e modificar proteínas corretamente e se podem produzir produtos alvo de alto rendimento.
1.2 Desenhar a sequência do gene e clonar:
Depois que as bactérias hospedeiras são selecionadas, a sequência do gene Epitalon (incluindo sequências de base de alanina, ácido glutâmico, asparagina e lisina) precisa ser inserida na bactéria hospedeira por meio da tecnologia de recombinação de DNA. Normalmente, a sequência do gene é clonada em um vetor de expressão que inclui elementos como sequências promotoras e terminadoras e um marcador antibiótico selecionável.
1.3 Expressão e purificação:
Após a conclusão da clonagem, o vetor de expressão é transformado na bactéria hospedeira e depois cultivado. Durante o processo de cultivo, a bactéria hospedeira sintetizará o Epitalon de acordo com a sequência do gene no vetor de expressão. Uma vez que o produto é produzido em quantidade suficiente, ele pode ser isolado das células por diferentes métodos de purificação e o Epitalon de alta pureza é obtido.
2. Método catalisado por enzima: O método catalisado por enzima consiste em sintetizar Epitalon ligando diferentes aminoácidos com várias enzimas. Por exemplo, a L-glutamato-5-aminase é usada para catalisar a reação de glutamato e butirato para sintetizar Glu-OtBu. Em seguida, use L-asparaginase para catalisar a reação de condensação de asparagina e Ala-Hyp-Glu-OtBu para obter Epitalon.
Os métodos de síntese do Epitalon são divididos principalmente em síntese química e biossíntese. A síntese química é atualmente o método de síntese Epitalon mais comumente usado. Biossíntese é preparar Epitalon através da biocatálise de microorganismos ou enzimas sintéticas, incluindo fermentação e catálise enzimática. Embora os métodos biossintéticos tenham grande potencial, ainda são necessárias mais pesquisas e otimização. O Epitalon é um medicamento potencial com amplas perspectivas de aplicação, que pode ser usado nas áreas de antienvelhecimento, regulação imunológica, neuroproteção e tratamento do câncer. Ao mesmo tempo, o Epitalon também pode ser usado como alimento saudável e produto de cuidados com a saúde para ajudar os consumidores a resistir ao envelhecimento, aumentar a imunidade e reduzir o risco de doenças. Embora a pesquisa sobre o Epitalon ainda esteja em sua infância, acredita-se que, com a pesquisa aprofundada sobre seu mecanismo e função, o Epitalon se tornará um importante medicamento e produto de saúde.